根瘤菌k599具有什么抗性

根瘤菌k599具有什么抗性？

　　发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌（NCPPB2659）含有pRi2659农杆碱型Ri质粒，具有广泛的宿主范围（葫芦科，豆科，茄科等），同时具有链霉素抗性。本公司生产的K599化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒（卡那霉素抗性）检测，转化效率>103 cfu/μg DNA。

　　常规操作方法

1.取-80℃保存的K599发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。

2. 每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA（转化效率较高，第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量），用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀，依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

3. 冰浴中拿出放室温，加入700μl 无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2小时。

　　4. 6000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3 天

● 农杆菌相关抗生素配方：

　　抗生素

　　配方

　　原液

　　工作液

　　羧苄青霉素 (carb)

　　双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌

　　50 mg/ml

　　50 μg/ml

　　硫酸卡那霉素 (kan)

　　双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌

　　50 mg/ml

　　50 μg/ml

　　链霉素 (strep)

　　双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌

10 mg/ml

　　50 μg/ml

　　利福平 (rif)

　　DMSO溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌

　　10 mg/ml

　　20 μg/ml

　　庆大霉素 (gent)

　　双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌

　　20 mg/ml

　　40 μg/ml

　　氯霉素（cam）

　　无水乙醇溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌

　　34 mg/ml

　　34 ug/ml

根瘤菌k599具有链霉素抗性。

根瘤菌（Rhizobium）主要指与豆类作物根部共生形成根瘤并能固氮的细菌，一般指根瘤菌属和慢生根瘤菌属；两属都属于根瘤菌目。

根瘤菌细胞呈杆状，有鞭毛和荚膜，鞭毛为正常的活动器官，无芽孢，革兰氏染色阴性，属需氧型。

根瘤菌侵入寄主根内，刺激根部皮层和中柱鞘的某些细胞，引起这些细胞的强烈生长，使根的局部膨大形成根瘤。

K599 具有链霉素抗性,不可用于具有链霉素抗性质粒的转化. 北京庄盟国际生物基因科技有限公司 Beijing Zoman Biotechnology Co.,Ltd. ...。发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌（NCPPB2659）含有pRi2659农杆碱型Ri质粒，具有广泛的宿主范围（葫芦科，豆科，茄科等），同时具有链霉素。